Флуоресценција во Ситу хибридизација
Флуоресцентната in situ хибридизација (FISH) е една од неколкуте техники кои се користат за пребарување на ДНК на клетките на клетките, во потрага по присуство или отсуство на специфични гени или делови од гени.
Многу различни видови на рак се поврзани со познати генетски абнормалности. И по генетски, ние не зборуваме само за наследноста. Во текот на целиот живот, клетките можат да прават грешки кога ќе се делат и растат.
Мутации во ДНК кои се поврзани со рак може да се акумулираат во овие клетки.
Како функционира ФИШ?
FISH е техника која користи флуоресцентни сонди за откривање на специфични гени или делови од гени (секвенци на ДНК). Персоналот на лабораториите на медицинскиот центар и онколозите ја користат FISH за да помогнат во проценувањето на пациентите кои имаат рак, а понекогаш и да го следат пациентот кој веќе бил дијагностициран со рак и лекуван.
РИБС може да се направи со користење на разни видови на мостри според локацијата и видот на рак на кој се сомнева: Туморските клетки добиени од периферна крв, од биопсија на коскената срцевина или од биопсија на лимфни јазли и формалин фиксирано фиксирано парафин ткиво (ова се однесува на примерок од ткиво што се обработува во лабораторија и вграден во вид на восок, што го прави поригиден, така што може да се исече на тенки делови и да се монтира за гледање под микроскоп).
Што значи писма?
"H" во FISH се однесува на хибридизација.
Во молекуларна хибридизација, етикетирана ДНК или РНК секвенца се користи како сонда - визуелизира црвена Лего тула, ако сакате. Сондата се користи за откривање на контраст Лего тула, или ДНК секвенца, во биолошки примерок.
ДНК во примерокот е како купови Лего цигли, а повеќето цигли во овие купови нема да се совпаднат со нашата црвена сонда.
И сите твои цигли се уредно организирани во 23 пара парчиња од тули - секој куп е еден од вашите парни хомологна хромозоми, повеќе или помалку. За разлика од Лего тули, нашата црвена лего сонда е како силен магнет и го наоѓа својот натпревар, без да мора да ги сортираме куките.
"Ф" се однесува на флуоресценција. Нашата црвена сонда може да се изгуби во купишта тули, така што е обележана со обоени флуоресцентни бои, така што ќе светат. Кога ќе го најде својот натпревар меѓу 23 парните парчиња, флуоресцентна ознака ја открива неговата локација. Значи, сега можете да видите како истражувачите и лекарите може да го користат FISH за да помогнат во идентификувањето каде (кој куп, или кој хромозом) се наоѓа одреден ген за даден поединец.
"I" и "S" се залагаат на самото место . Ова се однесува на фактот дека нашата црвена Лего тула го бара својот натпревар во примерокот што го дадовте .
Што е со специфични крвни рак?
FISH и други in-situ хибридизациони процедури се користат за дијагностицирање на различни хромозомски абнормалности - промени во генетскиот материјал, промени во хромозомите, вклучувајќи го и следното:
Бришење - дел од хромозомот нема
Транслокација - дел од еден хромозом се распаѓа и се држи на друг хромозом
Инверзија - дел од хромозомот се распаѓа и повторно се враќа назад, но во обратен редослед
Дуплирањето - дел од хромозомот е присутно во премногу копии во ќелијата
Секој вид на рак може да има свој сет на хромозомски промени и релевантни сонди. РИБА не само што помага да се идентификуваат првичните генетски промени во процесот на болеста како ракот, но исто така може да се користи за следење на одговорот на терапијата и ремисија на болеста.
Генетските промени откриени од страна на FISH понекогаш нудат дополнителни информации за тоа како рак на поединецот е веројатно да се однесуваат, врз основа на она што е забележано во минатото кај луѓе со ист вид на рак и слични генетски промени. Понекогаш РИБС се употребува откако веќе е направена дијагнозата, за да се прибере дополнителни информации кои можат да помогнат да се предвиди исходот на пациентот или најдобриот третман.
РИБА може да ги идентификува хромозомските абнормалности кај леукемиите , вклучително и кај хроничната лимфоцитна леукемија (CLL). За хронична лимфоцитна леукемија / мал лимфоцитен лимфом, РИБС им овозможува на пациентите да ја откријат својата прогностичка категорија: добра, средна или сиромашна. Кај акутната лимфобластна леукемија (ALL), генетиката на леукемичните клетки може да ви каже за нивото на ризик од рак и да помогне во насочувањето на терапевтските одлуки.
FISH панели се исто така достапни за лимфом, мултипли миеломи, пролиферативни нарушувања на плазма клеточните клетки и миелодиспластичен синдром. Во случај на лимфом на клеточна клетка, на пример, постои транслокација која РИБС може да ја открие наречена GH / CCND1 t (11; 14), која често се поврзува со овој лимфом.
Зошто риба?
Предност на FISH е дека не мора да се изведува на клетки кои активно се делат. Цитогенетското тестирање обично трае околу три недели, бидејќи клетките на ракот мора да растат во лабораториски садови за околу 2 недели пред да можат да се тестираат. Спротивно на тоа, резултатите од FISH обично се достапни од лабораторијата во рок од неколку дена.
> Извори:
> Цитогенетско тестирање на рак на ЦПТ кодови.
> Флуоресценција во Ситуа хибридизација (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Флуоресценција во Ситуа хибридизација (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Упатство за флуоресценција при испитување на хибилизација на Ситу во хематолошки нарушувања. Весник на молекуларна дијагностика: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.